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Tesi sperimentale su nuovi inibitori della ossidosqualene ciclasi umana ricombinante

Pubblicato: Lunedì 18 marzo 2013 da Amministratore

Presso il laboratorio di Biochimica e Biologia Molecolare del Dipartimento di Scienza e Tecnologia del Farmaco è disponibile N. 1 posto per tesi sperimentale in Biochimica (relatore Prof. G. Balliano) su "Nuovi inibitori della ossidosqualene ciclasi umana espressa in lievito".

I composti, progettati e sintetizzati dal Prof. Franz Bracher della Università Ludwig-Maximilians di Monaco di Baviera, sono già stati stati provati su linee cellulari umane come inibitori della sintesi del colesterolo, risultando, alcuni, molto efficaci (IC50 pari a 10-20 nanomolare).

Breve descrizione del lavoro sperimentale:

       -coltura di linee cellulari di lievito (Saccharomyces cerevisiae/ Pichia pastoris) esprimenti il gene per la ossidosqualene ciclasi umana;

       -incubazione delle cellule di lievito ricombinanti con acido acetico radioattivo (in assenza e in presenza di inibitori), estrazione della frazione insaponificabile, separazione cromatografica (TLC) e determinazione della distribuzione della radioattività tra i componenti (radioscansione della piastra TLC);

       -omogenizzazione e preparazione di frazioni subcellulari (microsomi/lipid particles) arricchite di ossidosqualene ciclasi;

       -incubazione di frazioni subcellulari con ossidosqualene radioattivo (in assemza e in presenza di inibitori), analisi radiocromatografica del rapporto tra substrato (ossidosqualene) e prodotto (lanosterolo), determinazione della IC50.

INIZIO TESI: gennaio-febbraio 2013

DURATA: sei mesi

Informazioni: Prof. Gianni Balliano, Prof. Franca Viola, Dott. Simona Oliaro

 

 

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Ultimo aggiornamento: 07/12/2012 16:39

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