Tesi sperimentale su nuovi inibitori della ossidosqualene ciclasi umana ricombinante
Presso il laboratorio di Biochimica e Biologia Molecolare del Dipartimento di Scienza e Tecnologia del Farmaco è disponibile N. 1 posto per tesi sperimentale in Biochimica (relatore Prof. G. Balliano) su "Nuovi inibitori della ossidosqualene ciclasi umana espressa in lievito".
I composti, progettati e sintetizzati dal Prof. Franz Bracher della Università Ludwig-Maximilians di Monaco di Baviera, sono già stati stati provati su linee cellulari umane come inibitori della sintesi del colesterolo, risultando, alcuni, molto efficaci (IC50 pari a 10-20 nanomolare).
Breve descrizione del lavoro sperimentale:
-coltura di linee cellulari di lievito (Saccharomyces cerevisiae/ Pichia pastoris) esprimenti il gene per la ossidosqualene ciclasi umana;
-incubazione delle cellule di lievito ricombinanti con acido acetico radioattivo (in assenza e in presenza di inibitori), estrazione della frazione insaponificabile, separazione cromatografica (TLC) e determinazione della distribuzione della radioattività tra i componenti (radioscansione della piastra TLC);
-omogenizzazione e preparazione di frazioni subcellulari (microsomi/lipid particles) arricchite di ossidosqualene ciclasi;
-incubazione di frazioni subcellulari con ossidosqualene radioattivo (in assemza e in presenza di inibitori), analisi radiocromatografica del rapporto tra substrato (ossidosqualene) e prodotto (lanosterolo), determinazione della IC50.
INIZIO TESI: gennaio-febbraio 2013
DURATA: sei mesi
Informazioni: Prof. Gianni Balliano, Prof. Franca Viola, Dott. Simona Oliaro
- Biochimica - Farmacia (STF0050)
- Biochimica (CTF) (FAR0024 )