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TECNOLOGIA DEL DNA RICOMBINANTE

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RECOMBINANT DNA TECHNOLOGY

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Anno accademico 2022/2023

Codice dell'attività didattica
STF0264
Docente
Simonetta Oliaro Bosso (Titolare del corso)
Corso di studi
[f003-c503] laurea magistrale in farmacia - a torino
Anno
4° anno 5° anno
Periodo didattico
Secondo semestre
Tipologia
Affine o integrativo
Crediti/Valenza
4
SSD dell'attività didattica
BIO/10 - biochimica
Modalità di erogazione
Tradizionale
Lingua di insegnamento
Italiano
Modalità di frequenza
Consigliata
Tipologia d'esame
Orale
Propedeutico a
Si consiglia la frequenza al corso agli studenti che intendano svolgere la tesi sperimentale presso il gruppo di Biochimica e Biologia Molecolare del DSTF (Prof.ssa Oliaro Bosso - Prof. Adinolfi - Prof. Giraudo)
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Sommario insegnamento

Oggetto:

Obiettivi formativi

Fornire conoscenze di ingegneria genetica, necessarie per lo sviluppo e la preparazione di farmaci biotecnologici.

Approfondire le conoscenze relative ai meccanismi molecolari e regolativi dell'espressione genica con particolare attenzione alle implicazioni patologiche ed alle possibili applicazioni diagnostiche e terapeutiche.

The course is aimed to: 1) provide knowledge of genetic engineering, necessary for the development and preparation of biotechnological drugs. 2) deepen the knowledge on molecular mechanisms of gene expression and regulation, giving particular attention to pathological aspects and therapeutic and biotechnological applications.

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Risultati dell'apprendimento attesi

CONOSCENZA E CAPACITÀ DI COMPRENSIONE Acquisizione di conoscenze relative alla tecnologia del DNA ricombinante, in particolare riguardanti le tecniche di clonaggio molecolare, di espressione di proteine ricombinanti, di analisi dell'espressione genica e delle mutazioni geniche.
CAPACITÀ DI APPLICARE CONOSCENZA E COMPRENSIONE Acquisizione della capacità di applicare le conoscenze relative alla biologia molecolare per comprendere e interpretare in modo logico le tecniche di laboratorio necessarie per lo studio di queste problematiche.

AUTONOMIA DI GIUDIZIO Acquisizione di consapevole autonomia di giudizio con riferimento a
valutazione e interpretazione di dati sperimentali per scelte strategiche in situazioni nuove.
ABILITÀ COMUNICATIVE Acquisizione di competenze e strumenti per la comunicazione nella forma scritta e orale, in lingua italiana, unitamente all'utilizzo di linguaggi grafici e formali.
CAPACITÀ DI APPRENDIMENTO Acquisizione di capacità autonome di apprendimento e di
autovalutazione della propria preparazione, atte ad intraprendere gli studi successivi con un alto grado di autonomia.

KNOWLEDGE AND UNDERSTANDING Acquisition of the skills concerning molecular biology principles with a focus on recombinant DNA technology, gene regulation mechanisms, DNA mutations and cellular DNA damage repair mechanisms.

APPLYING KNOWLEDGE AND UNDERSTANDING Acquisition of the ability to apply the knowledge of the molecolar biology to understand and interpret in a logical way the laboratory and bioinformatics techniques necessary for the study of these issues.

MAKING JUDGEMENTS Acquisition of aware judgment autonomy concerning evaluation and
interpretation of experimental data in order to achieve strategic choices in unkonw situations.
COMMUNICATION SKILLS Acquisition of oral and written communication skills and expertise, in italian, as well as the ability to use graphical and formal languages.
LEARNING SKILLS. Acquisition of autonomous learning capacity and self-assessment of its
preparation, in order to undertake subsequent studies with a high degree of autonomy.

 

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Modalità di insegnamento

L’insegnamento si articola in 32 ore di didattica frontale, nelle quali verranno proposte lezioni teoriche ed esercitazioni pratiche nel laboratorio di ricerca della docente.

La frequenza non è obbligatoria ma è consigliata la frequenza alle lezioni propedeuitiche alle esercitazioni pratiche di laboratorio.

Il materiale presentato a lezione (slides) è pubblicato sulla piattaforma Moodle, alla pagina dell'insegnamento.

Sono previsti momenti di interazione con gli studenti/studentesse, collegiali, a piccoli gruppi o

individuali.

The teaching is divided into 32 hours of frontal teaching and practical exercises in the laboratory. The didactic material (slides) is published on the Moodle platform.  At the students' request of students, there are opportunities for discussion in small groups or individuals.

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Modalità di verifica dell'apprendimento

La prova d'esame è orale e prevede la preparazione di una relazione scritta in cui sarà sviluppato uno degli argomenti affrontati a lezione e visti nel laboratorio della docente.

The exam is oral and includes a written report on the experience carried out in the laboratory.

 
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Programma

Il corso si dividerà in due parti.

Nella prima parte verranno sviluppati gli argomenti inerenti il clonaggio di geni e la preparazione di proteine ricombinanti utilizzate in terapia come biofarmaci. Nello specifico:   

- Enzimi di restrizione e legatura di molecole di DNA

- Vettori e plasmidi di clonaggio e di espressione

- Estrazione e purificazione di acidi nucleici

- Elettroforesi di acidi nucleici, rivelazione, dosaggio spettrofotometrico

- Espressione di proteine ricombinanti in E. coli e in eucarioti

- PCR e sue varianti (RT-PCR, …)

- Sequenziamento del DNA e piattaforme di nuova generazione

Nella seconda parte del corso verranno invece sviluppate alcune delle metodiche e delle strategie utilizzate per ingegnerizzare proteine, per valutare l’espressione genica, e nella diagnostica molecolare. Nello specifico:

- Mutagenesi sito-specifica

- Southern e Northern Blot, microarray

- Analisi del fingerprinting genetico (identificazione di individui responsabili di crimini, test di paternità, analisi di resti biologici, compatibilità per i trapianti d’organo,...). 

- Polimorfismi e analisi delle varianti geniche

- Crispr-Cas

The first part of the course is focused on the DNA cloning and on the preparation of recombinant proteins used as biothecnological drugs. In particular:

- Restriction enzymes and DNA ligation

- Cloning and expression vectors

- Purification of nucleic acids from bacteria cells

- Nucleic acids electrophoresis and quali-quantitative analysis of nucleic acids

- Expression of recombinant proteins in bacteria and eucariotic cells

- PCR: principle and applications (RT-PCR, …)

- DNA sequencing and Next Sequencing

The second part of course is focused on new methods and strategies used to evaluate to gene expression and and in molcecular diagnostics. In particular:

- Site-specific mutagenesis

- Southern and Northern Blot, microarray

- DNA fingerprinting (legal medecine, dentificazione di individui responsabili di crimini, test di paternità, analisi di resti biologici, compatibilità per i trapianti d’organo,...). 

- DNA Polymorph - analysis of genetic variants

- Crispr-Cas

Testi consigliati e bibliografia



Oggetto:
Libro
Titolo:  
Tecniche e metodi per la biologia molecolare
Anno pubblicazione:  
2020
Editore:  
Zanichelli
Autore:  
Francesco Amaldi, Piero Benedetti, Graziano Pesole, Paolo Plevani
Obbligatorio:  
No
Oggetto:

"DNA RICOMBINANTE" J.D. Watson et al., Zanichelli (2008)

"BIOLOGIA MOLECOLARE" F. Amaldi et al., Zanichelli (2014)



Oggetto:
Ultimo aggiornamento: 10/03/2023 17:30

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