- Oggetto:
- Oggetto:
Biochimica applicata - Farmacia
- Oggetto:
Anno accademico 2008/2009
- Codice dell'attività didattica
- F 3150
- Docente
- Prof. Franca Cecilia VIOLA (Titolare del corso)
- Corso di studi
- [f003-c501] laurea a ciclo unico in farmacia - a torino
- Anno
- 3° anno
- Periodo didattico
- Primo semestre
- Tipologia
- Fondamentale
- Crediti/Valenza
- 5
- Oggetto:
Sommario insegnamento
- Oggetto:
Obiettivi formativi
descrizione delle principali metodologie adottate nei laboratori di biochimica, biochimica clinica e biologia molecolare e nozioni di base sul trasferimento dell'informazione genetica dal DNA alle proteine.
Requisiti: conoscenze di base di chimica organica.- Oggetto:
Programma
BIOCHIMICA APPLICATA Crediti 5 - Codice F 3150
Principi basilari di biologia molecolare.Struttura del DNA: DNA A, B, Z, H. DNA circolari e superavvolti. Cenni di topologia. Replicazione del DNA nei procarioti e negli eucarioti. Telomeri e telomerasi. Retrotrascrizione con trascrittasi inversa. Il trasferimento dell'informazione genica: Sintesi e maturazione degli RNA messaggeri e ribosomiali nei procarioti e negli eucarioti ( modificazioni delle estremità 3' e 5' dopo la trascrizione, splicing, splicing alternativo, fattori di trascrizione e regolazione). SiRNA ( argomento svolto solo nell’A.A 2008-09).Codice genetico, RNA di trasporto, aminoacil-tRNA sintetasi e biosintesi delle proteine.
Tecnologia del DNA ricombinante.
Enzimi di restrizione, ricombinazione in vettori plasmidici, clonazione di geni, trascrittasi inversa e cDNA, librerie genomiche.
La biologia molecolare nella diagnostica biochimico-clinica.
Sonde molecolari, Southern Blot e diagnostica molecolare, analisi dei polimorfismi della lunghezza dei frammenti di restrizione (DNA fingerprinting) diagnostica mediante reazione polimerasica a catena (PCR), sequenziamento del DNA.
Elettroforesi di acidi nucleici e proteine.
Principi generali ed esempi di applicazioni : elettroforesi in agarosio degli acidi nucleici; elettroforesi SDS-PAGE; separazione elettroforetica, composizione e funzione delle frazioni sieroproteiche. Isoelettrofocalizzazione ed elettroforesi bidimensionale.
Metodi cromatografici applicati alla purificazione di proteine.
Gel cromatografia e cromatografia di scambio ionico e di affinità.
Applicazioni spettrofotometriche.Principi generali, definizione di trasmittanza ed assorbanza, legge di lambert-Beer.
Spettri di assorbimento nell’UV di DNA e proteine, di coenzimi come il NAD e di emoproteine.
Dosamento di DNA e proteine totali.
Generalità riguardanti la determinazione delle attività enzimatiche. Valutazione quantitativa dell’attività enzimatica: unità di misura, attività specifica, velocità di una reazione enzimatica e considerazioni sulle condizioni otttimali di misura: determinazione dell'attività enzimatica con metodi spettrofotometrici con esempi ( citocromo c reduttasi, malico deidrogenasi, maltasi, transaminasi e metodo della reazione accoppiata). Utilizzo di enzimi per la determinazione quantitativa di metaboliti (glucoso, colesterolo).
Tecniche immunologiche.
Principi generali. Reazione antigene-anticorpo. Sistemi di dosaggio immunologico basati sulla marcatuta di antigeni od anticorpi con isotopi radioattivi (RIA), enzimi (ELISA), sostanze fluorescenti (FIA).
Western blot, Southern blot, Northern blot
Modalità d'esame: prova orale.
Testi consigliati e bibliografia
- Oggetto:
- Testi consigliati /o di consultazione:
K.WIlson, J. Walker: Biochimica e biologia molecolare-principi e tecniche.- Raffaello Cortina editore.
C.K. Mathews et al, Biochimica, Casa Editrice Ambrosiana
Campbell, Farrel, Biochimica, EdiSES - Oggetto:
Note
Modalità d'esame: prova orale.- Oggetto:
